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NIH/3T3 (小鼠胚胎細(xì)胞)
| 型 號(hào)： | |
| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
NIH/3T3 (小鼠胚胎細(xì)胞)正在出售的產(chǎn)品：HA Others H7N2 甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 IgG3 Others Human 人 IgG3-Fc / IGHG3 人細(xì)胞裂解液
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
NIH/3T3 (小鼠胚胎細(xì)胞)
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 小鼠 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 小鼠細(xì)胞系 |
商品介紹
別稱 NIH/3T3; NIH-3T3; NIH3T3; 3T3; 3T3NIH; 3T3-Swiss; Swiss-3T3; Swiss/3T3; Swiss 3T3; Swiss3T3
種屬 小鼠
年齡（性別） 胚胎
組織來(lái)源 胚胎
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))
NIH/3T3細(xì)胞是從NIH Swiss小鼠胚胎培養(yǎng)物中建立的高度接觸性抑制的連續(xù)傳代細(xì)胞株。為了培育在形態(tài)學(xué)特征上更適合于進(jìn)行轉(zhuǎn)化分析的亞株，建立的NIH/3T3細(xì)胞株又進(jìn)行了5輪以上亞克隆。NIH/3T3細(xì)胞對(duì)肉瘤病毒的轉(zhuǎn)化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，對(duì)DNA轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)染研究十分有用；NIH/3T3細(xì)胞鼠痘病毒陰性。 |
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% CS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~20小時(shí)
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： PF/PFP ELISA Kit
Mouse 6 keto prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)檢測(cè)試劑盒
ELISA 小鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(mouse CF) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLF/LTF(RabbitLactoferrin)ELISAKit兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白
通用型HRP-DAB底物顯色試劑盒10次
ELISAKitMMP11基質(zhì)金屬蛋白酶11
PDCD1LG2重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
C-Peptide( C-PEP 0.5mgC-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽)
LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白
TNFRSF17 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
C-Peptide( C-PEP 0.5mgC-Peptide( C-PEP ) C-肽(C肽)
IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白
PDCD1LG2重組大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
TNFRSF17 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
LGALS8重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
NIH/3T3 (小鼠胚胎細(xì)胞)小鼠25羥基3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat fibronectin (FN) ELISA Kit 大鼠纖連蛋白(FN)檢測(cè)試劑盒
HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit 人超敏生長(zhǎng)激素(US-GH)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanconnectivetissue-activatingpeptideⅢ,CTAPⅢ檢測(cè)試劑盒人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織CDK6/CYCD1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
Humanproteiyrosinephosphatase,PTP/PTPaseELISAKit人蛋白酪0酸酶(PTP/PTPase/CD148)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
土壤無(wú)機(jī)0（S-PHOS）含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
土壤總0/有機(jī)0/無(wú)機(jī)0含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
土壤脲酶（UE)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
土壤多酚氧化酶（PPO）測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
