NCI-H661 (人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！

商品詳情：

別稱 H661; H-661; NCIH661

種屬 人類

年齡（性別） 男性，43歲

組織來(lái)源 肺

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述：NCI-H661細(xì)胞源自一位43歲患有大細(xì)胞肺癌的男性白人的淋巴結(jié)；NCI-H661細(xì)胞缺乏產(chǎn)生粘液和鱗狀分化的亞顯微結(jié)構(gòu)和生化證據(jù)。NCI-H661細(xì)胞表達(dá)的p53mRNA易于檢測(cè)，明顯高于正常肺細(xì)胞的水平，與此同時(shí)，沒(méi)有出現(xiàn)總體性的結(jié)構(gòu)DNA崎變，它們可以說(shuō)明存在點(diǎn)突變或很小的變異。NCI-H661細(xì)胞角蛋白和波形蛋白纖維染色陽(yáng)性，神經(jīng)絲三聯(lián)體蛋白陰性。

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~60小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： UCP1 ELISA Kit

Pla vitamin E (VE) ELISA Kit 植物(VE)檢測(cè)試劑盒

MouseImmunoglobulinE,IgEELISAKit 小鼠免疫球蛋白E(IgE)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit人血漿α顆粒膜蛋白

細(xì)胞HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitSOD大鼠超氧化物歧化酶

PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein

尾加壓素2(UST2)重組蛋白 Recombinant Urotensin 2 (UST2)

RAET1E重組人 RAET1E / ULBP4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD55 Protein Human 重組人 CD55 / DAF 蛋白

HA Protein H1N3 重組甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

尾加壓素2(UST2)重組蛋白 Recombinant Urotensin 2 (UST2)

CD55 Protein Human 重組人 CD55 / DAF 蛋白

PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein

HA Protein H1N3 重組甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

RAET1E重組人 RAET1E / ULBP4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

NCI-H661 (人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞)小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Rat calcium binding protein (CR) ELISA Kit 大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)檢測(cè)試劑盒

Humanai-myelinaibodyIgAELISAKit 人抗髓0脂抗體IgA(ai-myelinAb)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CamelBeta-Endorphin,β-EP檢測(cè)試劑盒β內(nèi)啡肽(β-EP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

魚類組織元素?zé)晒舛繖z測(cè)試劑盒20次

Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit小鼠胰島素自身抗體(IAA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體檢測(cè)試劑盒   小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體試劑盒、小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒   小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白試劑盒、小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子檢測(cè)試劑盒   小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子試劑盒、小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

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