細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

人小腸上皮細(xì)胞；FHs74Int

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱；FHs74Int; FHs74 Int; 74Int；人小腸上皮細(xì)胞

種屬來源；人

年齡性別；女；3-4個月胚胎

組織來源；小腸

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；該細(xì)胞為正常的二倍體細(xì)胞，不具備無限增殖的能力。建議用戶收到細(xì)胞后，在細(xì)胞倍增5~8次內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)

STR位點(diǎn)；Amelogenin: X；CSF1PO: 10,11；D13S317: 11,12；D16S539: 11,12；D5S818: 11,12；D7S820: 9,10；THO1: 7,

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

半乳糖凝集素3(GAL3)重組蛋白 Recombinant Galectin 3 (GAL3)

CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白

MFI2重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白 Protein

SIRPG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL11重組人 IL11 / Interleukin 11 / IL-11 蛋白 Protein

FOLR1重組小鼠 FOLR1 / FR-alpha 蛋白 Protein

AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1 0.5mgAMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1) 腺苷單0酸活化蛋白激酶β1抗原

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His 標(biāo)簽) Protein

CD44 Protein Human 重組人 CD44 蛋白

LILRA5 Protein Rat 重組大鼠 LILRA5 蛋白

小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human mucin (ORM) ELISA Kit 人類粘蛋白(ORM)檢測試劑盒

Humaibonuclease,RNASEELISAKit 人核糖核酸酶(RNASE)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Bacillusthuringiensis,BT檢測試劑盒蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

A高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISAKit小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人小腸上皮細(xì)胞；FHs74Int小鼠(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠β酚(β-Nph)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠(AZT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)檢測試劑盒 ，英文名： MCP-3/CCL7 ELISA Kit

Porcine acetylcholine (ACh) ELISA Kit 豬乙酰(ACh)檢測試劑盒

ELISA 小鼠血管生成素-2(mouse Angiopoietin-2)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforLPAg(HumanLegionellapneumophilaaigen)ELISAKit人軍團(tuán)菌抗原

通用型CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次

ELISAKitIL-1β雞白介素1β