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大鼠膠質肉瘤細胞;9L/lacZ

大鼠膠質肉瘤細胞;9L/lacZ

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大鼠膠質肉瘤細胞;9L/lacZ 詳細資料

大鼠膠質肉瘤細胞;9L/lacZ

大鼠膠質肉瘤細胞;9L/lacZ

本公司所有產品僅供科學實驗,不做其他科學實驗外的使用!

種屬

大鼠

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

生長特性

貼壁生長

鑒定

STR鑒定正確

細胞形態(tài)


編號

GOY-01X1953

 

商品詳情:

大鼠膠質肉瘤細胞;9L/lacZ

細胞別稱;9L/lacZ;大鼠膠質肉瘤細胞

種屬來源;大鼠

年齡性別;雄性

組織來源;腦,膠質細胞

參考資料(來源文獻)

9L/lacZ細胞株1989年從9L細胞株(大鼠誘導的膠質瘤細胞株)發(fā)展而來。   用攜帶E. coli編碼beta-半乳糖苷酶lacZ基因和帶來G418抗性的Tn5基因BAG復制缺陷的逆轉錄病毒載體感染9L細胞株。 細胞在G418存在下培養(yǎng)14天,克隆,并檢測beta-半乳糖苷酶生成。 9L/lacZ產生高水平的酶,選擇其進行后續(xù)研究。   細胞持續(xù)表達lacZ報告基因產物,從E. coli衍生來的beta-半乳糖苷酶,從而可以通過組織切片的組織化學染色來鑒定單個腫瘤細胞。 同一片子上的淋巴細胞和其

 


大鼠膠質肉瘤細胞;9L/lacZ

細胞培養(yǎng)操作:

大鼠膠質肉瘤細胞;9L/lacZ
1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。

b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

大鼠膠質肉瘤細胞;9L/lacZ


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生長激素結合蛋白   英文名稱:   GH-binding protein   規(guī)格:      英文縮寫:   P

環(huán)0酸鳥苷   英文名稱:   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格:      英文縮寫:   cGMP

細胞培養(yǎng)注意事項 

大鼠膠質肉瘤細胞;9L/lacZ
一、 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象 發(fā)生請及時和我們聯系。

二、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題,責任由 客戶自行承擔。

三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細胞僅供科研使用。

八、備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

九、 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。


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